1927年大革命失敗后,,林育南在湖北轉入地下斗爭,先后任中共湖北省委常委兼宣傳部部長,、中共湖北省委代書記。1927年底赴上海,,任中共滬東區(qū)委書記,。1929年11月在上海參與籌備第五次全國勞動大會,他繼續(xù)被選為全國總工會執(zhí)委會委員,,任編輯委員會負責人,、秘書長,主持日常工作,。1930年起林育南任全國蘇維埃區(qū)域代表大會中央準備委員會秘書長,。
1931年1月17日,林育南同何孟雄,、李求實等在上海被國民黨反動當局逮捕,。在獄中,林育南經(jīng)受住了敵人的嚴刑拷打,寧死不屈,,對黨忠誠,,同敵人進行堅決斗爭,保持了共產(chǎn)黨員的堅定立場和崇高品格,。1931年2月7日,,林育南與何孟雄等24位共產(chǎn)黨員與革命者,在上海龍華英勇就義,,時年33歲,。