武漢疫情暴發(fā)前期，隨著感染人數(shù)的增多，醫(yī)生護(hù)士在前期尚未做足防護(hù)的時(shí)候成了密切接觸者。李艷教授回憶，當(dāng)時(shí)在檢驗(yàn)科的門(mén)口,，排起了兩百多人的醫(yī)護(hù)隊(duì)伍等著做核酸檢測(cè)。

“這是在危險(xiǎn)面前不能退縮的一群人,，他們冒著生命危險(xiǎn)在工作,。”李艷教授立即給醫(yī)院領(lǐng)導(dǎo)打電話(huà)建議,，讓醫(yī)護(hù)人員免費(fèi)做核酸檢測(cè),。

對(duì)疑似病人進(jìn)行早檢測(cè)、早隔離,、早治療是新冠肺炎疫情防控的關(guān)鍵,。今年1月在武漢新冠疫情爆發(fā)初期，針對(duì)RT-qPCR檢測(cè)試劑盒用于新冠病毒核酸檢測(cè)“假陰性”率較高且無(wú)法同時(shí)檢測(cè)其他秋冬季高發(fā),、癥狀與新冠相似的呼吸道病毒的難題,，李艷教授領(lǐng)銜聯(lián)合團(tuán)隊(duì)研究開(kāi)發(fā)了納米孔靶向測(cè)序（Nanopore Targeted Sequencing，NTS）檢測(cè)方法,，綜合病毒靶向擴(kuò)增和納米孔測(cè)序長(zhǎng)讀長(zhǎng),、實(shí)時(shí)數(shù)據(jù)輸出、高敏感性,、高準(zhǔn)確性的優(yōu)勢(shì),，首次實(shí)現(xiàn)6-10小時(shí)內(nèi)同時(shí)檢測(cè)SARS-CoV-2和其他10大類(lèi)、40余種呼吸道病毒,。同時(shí)，該方法還可對(duì)新型冠狀病毒基因組變異情況進(jìn)行檢測(cè),，監(jiān)控病毒的突變,，對(duì)病毒進(jìn)行分型。

李艷教授介紹,，用以往的RT-qPCR檢測(cè)核酸,，好比用一把狙擊槍去擊打樣本中的病毒核酸，有較大的概率打不中而造成“假陰性”率較高,，而核酸檢測(cè)納米孔靶向測(cè)序（NTS）則是撒網(wǎng),，并且同時(shí)撒十幾張網(wǎng)，就如同為病毒布下“天羅地網(wǎng)”,。這一方式突破以往國(guó)內(nèi)外疾病控制中心在RT-qPCR方法中推薦的少數(shù)位點(diǎn),，將檢測(cè)范圍擴(kuò)大到9個(gè)基因,、12個(gè)位點(diǎn)近1萬(wàn)個(gè)堿基(10kb)區(qū)域，全面覆蓋病毒基因組上主要基因區(qū)域,，100%覆蓋病毒基因組上毒力相關(guān)的重要基因,，大大增加捕獲病毒核酸的概率，從而顯著提高檢測(cè)敏感性和準(zhǔn)確性,。

與此同時(shí),，NTS所采用的目前最為快速的測(cè)序技術(shù)——納米孔測(cè)序，能在捕獲病毒核酸的同時(shí)讀出其序列,，不但能檢測(cè)出是否感染新冠病毒,，還能同時(shí)檢測(cè)出其他常見(jiàn)的呼吸道病毒，包括呼吸道合胞病毒,、冠狀病毒,、腺病毒、副流感病毒,、甲乙丙型流感病毒等,，為臨床診斷提供確切依據(jù)。更重要的是,，這種方法還能檢測(cè)在病毒傳播期間與毒力相關(guān)的基因是否發(fā)生突變,，對(duì)病毒進(jìn)行分型，從而迅速為后續(xù)的流行病學(xué)分析提供信息,，對(duì)臨床病人的診療提供指導(dǎo),。

這種新型檢測(cè)方法改以往的單一“狙擊”為普遍“撒網(wǎng)”，大大提升了病毒核酸的捕獲概率,、病毒陽(yáng)性檢出率和分型效率,，在國(guó)內(nèi)抗疫中發(fā)揮了重大作用。李艷教授介紹,，NTS檢測(cè)法從2020年1月開(kāi)始研發(fā),，2月初即在武漢大學(xué)人民醫(yī)院檢驗(yàn)科率先測(cè)試應(yīng)用并迅速推廣到抗疫一線醫(yī)院，極大提升了新冠病毒核酸檢測(cè)精準(zhǔn)度,，為武漢實(shí)現(xiàn)“應(yīng)收盡收,、應(yīng)治盡治”的防疫策略做出重大貢獻(xiàn)。6月24日,，這一研究成果正式刊發(fā)在國(guó)際知名期刊Small《微尺度》上,，為全球抗疫精準(zhǔn)施治提供中國(guó)“硬核科技”。

檢驗(yàn)病毒的醫(yī)護(hù)人員直接接觸樣本,，更為危險(xiǎn),。她和團(tuán)隊(duì)反復(fù)琢磨：如何在快速診斷的同時(shí)，確保直接接觸病毒樣本的醫(yī)護(hù)人員不被感染,。1月31日,，李艷教授帶著團(tuán)隊(duì)將新冠病毒滅活后再檢測(cè)的實(shí)驗(yàn)：將新冠病毒原始樣本放進(jìn)專(zhuān)用烤箱”,，加熱至56度放置45分鐘，取出靜止10-15分鐘后再檢測(cè),。實(shí)驗(yàn)結(jié)果證明：與原始樣本比對(duì),，滅活后數(shù)據(jù)結(jié)果未見(jiàn)明顯差異。這一方式隨后被迅速用于該實(shí)驗(yàn)室的檢測(cè),?！皩?shí)戰(zhàn)中從來(lái)沒(méi)有這么干過(guò)”，李艷教授說(shuō),，在核酸檢測(cè)的過(guò)程中,，他們不斷在找更優(yōu)解。

在抗擊新冠肺炎這場(chǎng)戰(zhàn)“疫”中,，時(shí)間就意味著生命,。李艷教授再次與提供病毒樣本試管的廠家實(shí)驗(yàn)，在試管中添加滅活制劑,，“不僅可以節(jié)省時(shí)間,，滅活關(guān)口前移也減少了與病毒的接觸環(huán)節(jié)?！苯Y(jié)果證明可行之后,，李艷教授立即再次把化學(xué)滅活的方案告知全國(guó)同行，迅速推進(jìn),。到目前為止,，核酸檢測(cè)的時(shí)間已經(jīng)從最初的8小時(shí)提高到3小時(shí)。

李艷教授團(tuán)隊(duì)通過(guò)病例研究發(fā)現(xiàn),，抗體免疫試劑檢測(cè)結(jié)果與患者感染的不同階段密切相關(guān),，新型冠狀病毒IgM和IgG抗體免疫聯(lián)合檢測(cè)對(duì)提高新冠病毒早期檢測(cè)的臨床敏感度具有重大價(jià)值。這一發(fā)表在《中華檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志》上的最新研究成果,，說(shuō)明抗體檢測(cè)可以非常有效地彌補(bǔ)核酸檢測(cè)漏檢的風(fēng)險(xiǎn),，在新冠病毒感染的及時(shí)診治及新冠肺炎防控中發(fā)揮重大的實(shí)驗(yàn)室診斷價(jià)值，將在診斷,、治療監(jiān)測(cè)和病程轉(zhuǎn)歸等方面提供更多幫助,。

一生所學(xué)盡付現(xiàn)在

這半年來(lái)，在不斷推進(jìn)核酸檢測(cè)成效的同時(shí),，李艷教授還在不斷更新一份PPT——快速提升新型冠狀病毒核酸檢測(cè)效率，把最新成果分享出來(lái),。

“我希望不僅是我們實(shí)驗(yàn)室能迅速應(yīng)對(duì),，同時(shí)也希望所有的實(shí)驗(yàn)室都能迅速應(yīng)對(duì)?！蔽錆h大學(xué)人民醫(yī)院檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)中心是國(guó)家臨床重點(diǎn)專(zhuān)科,，尤其是分子診斷水平處于全國(guó)檢驗(yàn)界的領(lǐng)先地位,，李艷教授希望能夠讓全國(guó)同行都能爭(zhēng)取更多應(yīng)對(duì)疫情的經(jīng)驗(yàn)。

“滅活后的標(biāo)本檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室生物安全可從二級(jí)降級(jí)到一級(jí)”,，PPT上的這句話(huà)回答的是“新冠核酸檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室級(jí)別”的問(wèn)題,，表達(dá)簡(jiǎn)單，一目了然,。

李艷教授說(shuō),，用大白話(huà)講專(zhuān)業(yè)，是為了“不僅要讓業(yè)內(nèi)人士看懂,，還要讓領(lǐng)導(dǎo),、非本專(zhuān)業(yè)人員都能懂?！?/p>

“希望領(lǐng)導(dǎo)能看懂,，是為了能讓領(lǐng)導(dǎo)更好地做決策?！弊鳛閷?zhuān)業(yè)人士同時(shí)也是管理者的李艷教授說(shuō),，她深知疫情當(dāng)前，應(yīng)變能力及管理水平都需要基于對(duì)實(shí)際情況的掌握,，而作為掌握最前沿研究成果的他們應(yīng)該學(xué)會(huì)“翻譯”醫(yī)學(xué)語(yǔ)言,。

“我從來(lái)就沒(méi)有停止過(guò)學(xué)習(xí)?！崩钇G教授說(shuō),，不管是分子診斷專(zhuān)業(yè)，還是管理水平,，自己一直都在不斷學(xué)習(xí),。疫情期間，她還專(zhuān)門(mén)寫(xiě)日記,，記下所用所學(xué),。李艷教授把這一頁(yè)又一頁(yè)的日記歸納為八個(gè)字：一生所學(xué)盡付現(xiàn)在。（校對(duì)：姜成）