武漢疫情暴發(fā)前期,,隨著感染人數(shù)的增多,醫(yī)生護士在前期尚未做足防護的時候成了密切接觸者,。李艷教授回憶,當時在檢驗科的門口,,排起了兩百多人的醫(yī)護隊伍等著做核酸檢測,。
“這是在危險面前不能退縮的一群人,他們冒著生命危險在工作,?!崩钇G教授立即給醫(yī)院領(lǐng)導打電話建議,讓醫(yī)護人員免費做核酸檢測,。
對疑似病人進行早檢測,、早隔離、早治療是新冠肺炎疫情防控的關(guān)鍵,。今年1月在武漢新冠疫情爆發(fā)初期,,針對RT-qPCR檢測試劑盒用于新冠病毒核酸檢測“假陰性”率較高且無法同時檢測其他秋冬季高發(fā)、癥狀與新冠相似的呼吸道病毒的難題,,李艷教授領(lǐng)銜聯(lián)合團隊研究開發(fā)了納米孔靶向測序(Nanopore Targeted Sequencing,,NTS)檢測方法,綜合病毒靶向擴增和納米孔測序長讀長,、實時數(shù)據(jù)輸出,、高敏感性、高準確性的優(yōu)勢,,首次實現(xiàn)6-10小時內(nèi)同時檢測SARS-CoV-2和其他10大類,、40余種呼吸道病毒。同時,,該方法還可對新型冠狀病毒基因組變異情況進行檢測,,監(jiān)控病毒的突變,對病毒進行分型,。
李艷教授介紹,,用以往的RT-qPCR檢測核酸,,好比用一把狙擊槍去擊打樣本中的病毒核酸,有較大的概率打不中而造成“假陰性”率較高,,而核酸檢測納米孔靶向測序(NTS)則是撒網(wǎng),,并且同時撒十幾張網(wǎng),就如同為病毒布下“天羅地網(wǎng)”,。這一方式突破以往國內(nèi)外疾病控制中心在RT-qPCR方法中推薦的少數(shù)位點,,將檢測范圍擴大到9個基因、12個位點近1萬個堿基(10kb)區(qū)域,,全面覆蓋病毒基因組上主要基因區(qū)域,,100%覆蓋病毒基因組上毒力相關(guān)的重要基因,大大增加捕獲病毒核酸的概率,,從而顯著提高檢測敏感性和準確性,。
與此同時,NTS所采用的目前最為快速的測序技術(shù)——納米孔測序,,能在捕獲病毒核酸的同時讀出其序列,,不但能檢測出是否感染新冠病毒,還能同時檢測出其他常見的呼吸道病毒,,包括呼吸道合胞病毒,、冠狀病毒、腺病毒,、副流感病毒,、甲乙丙型流感病毒等,為臨床診斷提供確切依據(jù),。更重要的是,,這種方法還能檢測在病毒傳播期間與毒力相關(guān)的基因是否發(fā)生突變,對病毒進行分型,,從而迅速為后續(xù)的流行病學分析提供信息,,對臨床病人的診療提供指導。
這種新型檢測方法改以往的單一“狙擊”為普遍“撒網(wǎng)”,,大大提升了病毒核酸的捕獲概率,、病毒陽性檢出率和分型效率,在國內(nèi)抗疫中發(fā)揮了重大作用,。李艷教授介紹,,NTS檢測法從2020年1月開始研發(fā),2月初即在武漢大學人民醫(yī)院檢驗科率先測試應(yīng)用并迅速推廣到抗疫一線醫(yī)院,,極大提升了新冠病毒核酸檢測精準度,,為武漢實現(xiàn)“應(yīng)收盡收、應(yīng)治盡治”的防疫策略做出重大貢獻,。6月24日,,這一研究成果正式刊發(fā)在國際知名期刊Small《微尺度》上,,為全球抗疫精準施治提供中國“硬核科技”。
檢驗病毒的醫(yī)護人員直接接觸樣本,,更為危險,。她和團隊反復琢磨:如何在快速診斷的同時,確保直接接觸病毒樣本的醫(yī)護人員不被感染,。1月31日,,李艷教授帶著團隊將新冠病毒滅活后再檢測的實驗:將新冠病毒原始樣本放進專用烤箱”,加熱至56度放置45分鐘,,取出靜止10-15分鐘后再檢測,。實驗結(jié)果證明:與原始樣本比對,滅活后數(shù)據(jù)結(jié)果未見明顯差異,。這一方式隨后被迅速用于該實驗室的檢測,。“實戰(zhàn)中從來沒有這么干過”,,李艷教授說,,在核酸檢測的過程中,他們不斷在找更優(yōu)解,。
在抗擊新冠肺炎這場戰(zhàn)“疫”中,時間就意味著生命,。李艷教授再次與提供病毒樣本試管的廠家實驗,,在試管中添加滅活制劑,“不僅可以節(jié)省時間,,滅活關(guān)口前移也減少了與病毒的接觸環(huán)節(jié),。”結(jié)果證明可行之后,,李艷教授立即再次把化學滅活的方案告知全國同行,,迅速推進。到目前為止,,核酸檢測的時間已經(jīng)從最初的8小時提高到3小時,。
李艷教授團隊通過病例研究發(fā)現(xiàn),抗體免疫試劑檢測結(jié)果與患者感染的不同階段密切相關(guān),,新型冠狀病毒IgM和IgG抗體免疫聯(lián)合檢測對提高新冠病毒早期檢測的臨床敏感度具有重大價值,。這一發(fā)表在《中華檢驗醫(yī)學雜志》上的最新研究成果,說明抗體檢測可以非常有效地彌補核酸檢測漏檢的風險,,在新冠病毒感染的及時診治及新冠肺炎防控中發(fā)揮重大的實驗室診斷價值,,將在診斷、治療監(jiān)測和病程轉(zhuǎn)歸等方面提供更多幫助,。
一生所學盡付現(xiàn)在
這半年來,,在不斷推進核酸檢測成效的同時,,李艷教授還在不斷更新一份PPT——快速提升新型冠狀病毒核酸檢測效率,把最新成果分享出來,。
“我希望不僅是我們實驗室能迅速應(yīng)對,,同時也希望所有的實驗室都能迅速應(yīng)對?!蔽錆h大學人民醫(yī)院檢驗醫(yī)學中心是國家臨床重點??疲绕涫欠肿釉\斷水平處于全國檢驗界的領(lǐng)先地位,,李艷教授希望能夠讓全國同行都能爭取更多應(yīng)對疫情的經(jīng)驗,。
“滅活后的標本檢測實驗室生物安全可從二級降級到一級”,PPT上的這句話回答的是“新冠核酸檢測實驗室級別”的問題,,表達簡單,,一目了然。
李艷教授說,,用大白話講專業(yè),,是為了“不僅要讓業(yè)內(nèi)人士看懂,還要讓領(lǐng)導,、非本專業(yè)人員都能懂,。”
“希望領(lǐng)導能看懂,,是為了能讓領(lǐng)導更好地做決策,。”作為專業(yè)人士同時也是管理者的李艷教授說,,她深知疫情當前,,應(yīng)變能力及管理水平都需要基于對實際情況的掌握,而作為掌握最前沿研究成果的他們應(yīng)該學會“翻譯”醫(yī)學語言,。
“我從來就沒有停止過學習,。”李艷教授說,,不管是分子診斷專業(yè),,還是管理水平,自己一直都在不斷學習,。疫情期間,,她還專門寫日記,記下所用所學,。李艷教授把這一頁又一頁的日記歸納為八個字:一生所學盡付現(xiàn)在,。(校對:姜成)