因此,,如何規(guī)避現(xiàn)有的瓶頸,,捕捉到活體狀態(tài)下亞細(xì)胞、蛋白的運(yùn)動,,成為了課題組要攻克的難題,。
洞見新世界探尋生命原理
課題組提出了一種基于非共軸干涉系統(tǒng)的新型光學(xué)成像技術(shù)。該方法結(jié)合了結(jié)構(gòu)光照明顯微技術(shù)和多角度全內(nèi)反射照明顯微技術(shù),,適用于任何熒光染料標(biāo)記下的超分辨成像,。
常規(guī)光學(xué)顯微鏡的分辨率具有極限,在可見光照明區(qū)域,,橫向極限分辨率是成像光波長的一半(250-300納米),,軸向上500-600納米。而結(jié)構(gòu)光照明顯微技術(shù)只將橫向和軸向分辨率上提升了一倍,。
課題組巧妙地把多角度全內(nèi)反射照明引入到結(jié)構(gòu)光照明顯微技術(shù)中,,實(shí)現(xiàn)了橫向分辨率~100納米,軸向分辨率~40納米的三維超分辨成像,。
在成像速度提升方面,,課題組通過利用變角度倏失場照明下的結(jié)構(gòu)光成像,并結(jié)合計算成像模型,,使得三維成像速度大大提升,。同時由于所需光劑量低,成像速度快,減少了熒光漂白,,有利于長時程觀測,。對活細(xì)胞內(nèi)線粒體和微管的成像結(jié)果如圖2所示,揭示了它們的三維動態(tài)變化,。
“對細(xì)胞膜附近的細(xì)胞器進(jìn)行三維快速超分辨成像,,可以為亞細(xì)胞研究提供可能,揭示生命內(nèi)在規(guī)律,。”對此,,劉旭舉了如下例子:過去進(jìn)行藥物效果實(shí)驗(yàn),大多只能通過整體的結(jié)果研究來了解藥物療效,,而無法研究藥物是如何穿透細(xì)胞膜,,如何運(yùn)動以及如何相互作用的。未來就可通過MAIM顯微鏡,,了解這些動態(tài)過程,,從而大大提高各種研究的效率。
這一新穎的成像技術(shù)已經(jīng)研制成儀器,,目前正在產(chǎn)業(yè)化過程中,。