韓春雨

河北科技大學(xué)副教授韓春雨震驚全球?qū)W術(shù)界的新基因編輯技術(shù)NgAgo-gDNA，正遭遇越來越多的質(zhì)疑,。從5月2日他的論文發(fā)布在《自然-生物技術(shù)》網(wǎng)絡(luò)版之后,，到現(xiàn)在為止，全球仍沒有一家實驗室對外宣布,，能夠完全成功重復(fù)韓春雨的實驗?，F(xiàn)在已有多國科學(xué)家要求《自然-生物技術(shù)》介入調(diào)查,，并公開韓春雨實驗中的所有原始數(shù)據(jù)和實驗條件,。

北京時間7月29日，一度支持韓春雨的澳大利亞國立大學(xué)的基因?qū)W家Gaetan Burgio,，反戈一擊,。他在Twitter上發(fā)布長文《我的NgAgo經(jīng)歷》，否認(rèn)了自己7月15日之前部分重復(fù)實驗時得出的結(jié)論,，表示并無嚴(yán)格意義上的證據(jù)顯示韓春雨的NgAgo-gDNA技術(shù)有基因編輯的跡象,，并且要求韓春雨公開所有原始數(shù)據(jù)和實驗條件,。

韓春雨的NgAgo-gDNA技術(shù)，挑戰(zhàn)的是最為流行的基因編輯技術(shù)CRISPR-CAS9,，論文剛一發(fā)表,，就引發(fā)了轟動?；蚓庉嫾夹g(shù)是指能夠讓人類對目標(biāo)基因進(jìn)行“編輯”,，實現(xiàn)對特定DNA片段的敲除、加入等,。目前CRISPR-CAS9是最為普遍的基因編輯技術(shù),，被稱為“基因魔剪”。 5月2日,，韓春雨課題組的論文《DNA-guided genome editing using the Natronobacterium gregoryi Argonaute》在《Nature Biotechnology》在線發(fā)表,。繞開時興的CRISPR-CAS9技術(shù)，課題組利用格氏嗜鹽堿桿菌（Natronobacterium gregoryi）的Argonaute核酸內(nèi)切酶,，以DNA為介導(dǎo)進(jìn)行基因組編輯,，簡稱NgAgo-gDNA。

質(zhì)疑韓春雨的Gaetan Burgio在7月29日發(fā)布的長文中介紹了重復(fù)實驗的具體過程操作和結(jié)論,，附帶了7張實驗結(jié)果圖,。

受精卵原核注射NgAgo之后，基于囊胚的PCR結(jié)果,。

對NgAgo注射過的受精卵PCR產(chǎn)物的T7核酸內(nèi)切酶檢測,。

當(dāng)用高濃度5'磷酸化的ssDNA(25納克/微升)和NgAgo原核注射小鼠受精卵之后基于囊胚的PCR和電泳凝膠。

對小鼠囊胚進(jìn)行NgAgo,、5’磷酸化ssDNA原核共注射之后獲得囊胚,，進(jìn)行DNA提取、PCR擴增和測序之后的一個典型測序結(jié)果,。

微注射NgAgo的小鼠受精卵凝膠電泳,。

代表性的所有電泳膠的序列的Clustal比對。Ank-1作為參考序列,。

一個代表性測序色譜圖(使用反向引物測序),。

他表示：在多番嘗試、試驗3個不同的細(xì)胞后,，沒有發(fā)現(xiàn)嚴(yán)格意義上證明NgAgo發(fā)生基因編輯的證據(jù),；在他看來，NgAgo酶需要加熱到50攝氏度才能有效,，對37攝氏度下NgAgo內(nèi)切酶的活性表示質(zhì)疑,。

在長文中，Gaetan Burgio表示,，“《自然生物技術(shù)》期刊應(yīng)該要求韓春雨公開所有的原始數(shù)據(jù)和實驗條件”,，并認(rèn)為：“NgAgo的未來并不明朗,。”