韓春雨

河北科技大學(xué)副教授韓春雨震驚全球?qū)W術(shù)界的新基因編輯技術(shù)NgAgo-gDNA，正遭遇越來越多的質(zhì)疑,。從5月2日他的論文發(fā)布在《自然-生物技術(shù)》網(wǎng)絡(luò)版之后,，到現(xiàn)在為止,，全球仍沒有一家實(shí)驗(yàn)室對(duì)外宣布,，能夠完全成功重復(fù)韓春雨的實(shí)驗(yàn)?，F(xiàn)在已有多國(guó)科學(xué)家要求《自然-生物技術(shù)》介入調(diào)查，并公開韓春雨實(shí)驗(yàn)中的所有原始數(shù)據(jù)和實(shí)驗(yàn)條件,。

北京時(shí)間7月29日,，一度支持韓春雨的澳大利亞國(guó)立大學(xué)的基因?qū)W家Gaetan Burgio，反戈一擊,。他在Twitter上發(fā)布長(zhǎng)文《我的NgAgo經(jīng)歷》,，否認(rèn)了自己7月15日之前部分重復(fù)實(shí)驗(yàn)時(shí)得出的結(jié)論，表示并無嚴(yán)格意義上的證據(jù)顯示韓春雨的NgAgo-gDNA技術(shù)有基因編輯的跡象,，并且要求韓春雨公開所有原始數(shù)據(jù)和實(shí)驗(yàn)條件,。

韓春雨的NgAgo-gDNA技術(shù)，挑戰(zhàn)的是最為流行的基因編輯技術(shù)CRISPR-CAS9,，論文剛一發(fā)表,，就引發(fā)了轟動(dòng)?；蚓庉嫾夹g(shù)是指能夠讓人類對(duì)目標(biāo)基因進(jìn)行“編輯”,，實(shí)現(xiàn)對(duì)特定DNA片段的敲除、加入等,。目前CRISPR-CAS9是最為普遍的基因編輯技術(shù),，被稱為“基因魔剪”。 5月2日,，韓春雨課題組的論文《DNA-guided genome editing using the Natronobacterium gregoryi Argonaute》在《Nature Biotechnology》在線發(fā)表,。繞開時(shí)興的CRISPR-CAS9技術(shù)，課題組利用格氏嗜鹽堿桿菌（Natronobacterium gregoryi）的Argonaute核酸內(nèi)切酶,，以DNA為介導(dǎo)進(jìn)行基因組編輯,，簡(jiǎn)稱NgAgo-gDNA。

質(zhì)疑韓春雨的Gaetan Burgio在7月29日發(fā)布的長(zhǎng)文中介紹了重復(fù)實(shí)驗(yàn)的具體過程操作和結(jié)論,，附帶了7張實(shí)驗(yàn)結(jié)果圖,。

受精卵原核注射NgAgo之后，基于囊胚的PCR結(jié)果,。

對(duì)NgAgo注射過的受精卵PCR產(chǎn)物的T7核酸內(nèi)切酶檢測(cè),。

當(dāng)用高濃度5'磷酸化的ssDNA(25納克/微升)和NgAgo原核注射小鼠受精卵之后基于囊胚的PCR和電泳凝膠。

對(duì)小鼠囊胚進(jìn)行NgAgo,、5’磷酸化ssDNA原核共注射之后獲得囊胚,，進(jìn)行DNA提取、PCR擴(kuò)增和測(cè)序之后的一個(gè)典型測(cè)序結(jié)果,。

微注射NgAgo的小鼠受精卵凝膠電泳,。

代表性的所有電泳膠的序列的Clustal比對(duì)。Ank-1作為參考序列。

一個(gè)代表性測(cè)序色譜圖(使用反向引物測(cè)序),。

他表示：在多番嘗試,、試驗(yàn)3個(gè)不同的細(xì)胞后，沒有發(fā)現(xiàn)嚴(yán)格意義上證明NgAgo發(fā)生基因編輯的證據(jù),；在他看來,，NgAgo酶需要加熱到50攝氏度才能有效，對(duì)37攝氏度下NgAgo內(nèi)切酶的活性表示質(zhì)疑,。

在長(zhǎng)文中,，Gaetan Burgio表示，“《自然生物技術(shù)》期刊應(yīng)該要求韓春雨公開所有的原始數(shù)據(jù)和實(shí)驗(yàn)條件”,，并認(rèn)為：“NgAgo的未來并不明朗,。”