新冠肺炎疫情發(fā)生以來,,關(guān)于核酸檢測假陰性率過高的話題,,一直是各方關(guān)注的焦點(diǎn),。有報(bào)道稱,以熒光定量RT-PCR作為檢測手段的新冠病毒檢測的陽性率目前僅有30%—50%,,導(dǎo)致奇高的假陰性率,。
導(dǎo)致假陰性率發(fā)生的原因很多。2月22日,南京大學(xué)模式動物研究所發(fā)育生物學(xué)與遺傳學(xué)教授趙慶順接受科技日報(bào)記者獨(dú)家采訪時指出,,依據(jù)有關(guān)機(jī)構(gòu)發(fā)布的指南,,核酸檢測前需將采集到的樣品進(jìn)行56℃滅活,這極有可能使新冠病毒核酸被降解,,從而導(dǎo)致不能被正常檢出,,最終提高了假陰性率。該研究成果《病毒核酸提取前的高溫滅活過程顯著降低可檢出病毒核酸模板量》,,已在中國科學(xué)院科技論文平臺預(yù)發(fā)布,。
56℃滅活可能導(dǎo)致病毒核酸被降解
2019新型冠狀病毒的遺傳物質(zhì)是單鏈RNA。因此,,科研人員的目標(biāo)是在患者身上找到新冠病毒的RNA,。這也是臨床診斷金標(biāo)準(zhǔn)。
目前,,臨床檢測主要采用熒光定量RT-PCR試劑盒檢測,。該方法是將標(biāo)本中的特定RNA序列逆轉(zhuǎn)錄后進(jìn)行擴(kuò)增,經(jīng)過30次以上擴(kuò)增后,,病毒基因片段達(dá)到一定數(shù)量即可進(jìn)行可視檢測,。
“理論上,哪怕模板只有1個病毒,,就有可能被檢測出來,。”趙慶順說,,科研實(shí)踐中,,在模板(病毒)量大于100個的情況下,擴(kuò)增結(jié)果就會非常穩(wěn)定,。
但是,,趙慶順在網(wǎng)絡(luò)上看到一個教學(xué)視頻,不禁心生疑慮,。該視頻由北京協(xié)和醫(yī)院和北京市衛(wèi)健委聯(lián)合制作,。視頻3分08秒至3分40秒顯示:在制備核酸模板前,需將采集到的樣品在56℃條件下進(jìn)行30分鐘病毒滅活,。
記者在中華醫(yī)學(xué)會檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)分會發(fā)布的《2019新型冠狀病毒肺炎臨床實(shí)驗(yàn)室檢測的生物安全防護(hù)指南(試行第一版)》中也看到:核酸擴(kuò)增前,,可以對標(biāo)本先行消毒。包括56℃孵育30分鐘,,加蛋白酶K。