中華醫(yī)學(xué)會(huì)檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)分會(huì)發(fā)布的《新型冠狀病毒肺炎病毒核酸檢測專家共識(shí)》中,,明確指出需將樣品56℃孵育至少45分鐘或更高溫度進(jìn)行滅活。
記者通過采訪確認(rèn),,絕大多數(shù)檢驗(yàn)醫(yī)師均按照上述規(guī)范,進(jìn)行56℃條件下時(shí)間不等的病毒滅活,,然后才制備核酸模板,。
這樣做帶來的問題是,病毒RNA極易被核糖核酸酶降解,,因?yàn)檫@種酶在60℃時(shí)活性最高,。核糖核酸酶來自兩方面,一是樣本細(xì)胞內(nèi),,二是采集,、保存、運(yùn)輸過程中的外來污染物,。
進(jìn)行滅活處理是出于生物安全的考慮
“進(jìn)行滅活處理是出于生物安全的考慮,,保護(hù)從事檢測的工作人員不被病毒感染?!壁w慶順說,。
正是出于這方面的考慮,國家衛(wèi)健委發(fā)布的相關(guān)文件中,,明確要求對標(biāo)本進(jìn)行滅活處理,。
北京協(xié)和醫(yī)院制作的教學(xué)視頻以及中華醫(yī)學(xué)會(huì)檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)分會(huì)發(fā)布的《防護(hù)指南》和《專家共識(shí)》,依據(jù)正是來自國家衛(wèi)健委相關(guān)文件,,包括《新型冠狀病毒實(shí)驗(yàn)室生物安全指南(第二版)》《新型冠狀病毒肺炎實(shí)驗(yàn)室檢測技術(shù)指南(第三版)》等,。
但是,記者查詢了國家衛(wèi)健委相關(guān)文件,,其對于病毒滅活的具體方法并未做出明確規(guī)定,,只是籠統(tǒng)地要求:感染性材料或活病毒在采用可靠的方法滅活后進(jìn)行的核酸檢測。
趙慶順進(jìn)一步查閱了美國疾控中心,、香港大學(xué)公共衛(wèi)生學(xué)院以及華大基因發(fā)布的核酸檢測說明,,也未發(fā)現(xiàn)56℃滅活這一步驟。
病毒核酸降解對檢測結(jié)果影響究竟有多大
記者在采訪中發(fā)現(xiàn),,不同人士對這個(gè)問題的回答涇渭分明:
來自疾控部門,、中國醫(yī)學(xué)會(huì)檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)分會(huì)、相關(guān)醫(yī)院檢驗(yàn)醫(yī)師的看法是,不會(huì)對檢測結(jié)果有太大的影響,。而趙慶順等專家認(rèn)為,,核酸提取前對人體樣品進(jìn)行高溫殺毒處理,可能是導(dǎo)致新冠病毒核酸檢出假陰性率過高的重要原因之一,。