趙慶順以豬流行性腹瀉病毒(一種冠狀病毒,,來自活疫苗)為模型開展了高溫滅活對病毒可檢出量影響的研究,結(jié)果表明:保存在普通等滲溶液(Hank’s液)中的樣品經(jīng)56℃孵育30分鐘,,導(dǎo)致樣品中可檢出的冠狀病毒模板減少一半,,如果以92℃孵育5分鐘,則可檢出的冠狀病毒模板損失96%以上,。
“理論上,,不排除新冠病毒的目標(biāo)RNA片段在56℃以上高溫滅活中不易被降解的可能?!壁w慶順坦言,,“但我寧愿自己的判斷是錯的,也不希望因?yàn)槟硞€細(xì)節(jié)考慮不周而導(dǎo)致檢測結(jié)果出現(xiàn)假陰性,?!?/p>
另外,,不同品牌的樣品保存液,也會對檢測結(jié)果產(chǎn)生較大影響,。趙慶順在實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn),,在56℃30分鐘條件下,采用南京諾唯贊研發(fā)的R503保存液存放豬流行性腹瀉病毒樣品時(shí),,病毒核酸的可檢出量是對照組(Hank’s液)檢出量的3倍,;而如果是92℃5分鐘滅活,則檢出量是對照組的42倍,。
中華醫(yī)學(xué)會檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)分會主任委員王成彬教授在撰文回應(yīng)核酸檢測假陰性率較高現(xiàn)象時(shí)也指出,,不同提取試劑對最后提取到的核酸數(shù)量和質(zhì)量可能存在差別,從而直接影響檢測結(jié)果,。他建議,,對于某些高度疑似病例,或檢測結(jié)果難以確定的病例,,建議用2種以上試劑進(jìn)行檢測,、驗(yàn)證。
“假陰性意味著漏檢,,不僅會導(dǎo)致臨床中對疑似患者不能快速確診,,而且會使漏檢者成為潛在的病毒傳染源?!壁w慶順為此提出建議,,一是盡量使用無核糖核酸酶污染的樣本采集管,二是將標(biāo)本放置在可保護(hù)病毒核酸免受高溫滅活損壞的樣品保存液中,,從而確保樣品RNA從保存,、運(yùn)輸?shù)礁邷販缁畹鹊玫饺瘫Wo(hù),盡最大可能保證用于臨床檢測的核酸質(zhì)量,,減少病毒核酸可檢出模板在核酸提取前的人為損壞,。