趙慶順以豬流行性腹瀉病毒(一種冠狀病毒,來自活疫苗)為模型開展了高溫滅活對病毒可檢出量影響的研究,,結(jié)果表明:保存在普通等滲溶液(Hank’s液)中的樣品經(jīng)56℃孵育30分鐘,導致樣品中可檢出的冠狀病毒模板減少一半,,如果以92℃孵育5分鐘,則可檢出的冠狀病毒模板損失96%以上,。
“理論上,,不排除新冠病毒的目標RNA片段在56℃以上高溫滅活中不易被降解的可能,?!壁w慶順坦言,,“但我寧愿自己的判斷是錯的,也不希望因為某個細節(jié)考慮不周而導致檢測結(jié)果出現(xiàn)假陰性,。”
另外,,不同品牌的樣品保存液,也會對檢測結(jié)果產(chǎn)生較大影響,。趙慶順在實驗中發(fā)現(xiàn),在56℃30分鐘條件下,,采用南京諾唯贊研發(fā)的R503保存液存放豬流行性腹瀉病毒樣品時,病毒核酸的可檢出量是對照組(Hank’s液)檢出量的3倍,;而如果是92℃5分鐘滅活,則檢出量是對照組的42倍,。
中華醫(yī)學會檢驗醫(yī)學分會主任委員王成彬教授在撰文回應核酸檢測假陰性率較高現(xiàn)象時也指出,不同提取試劑對最后提取到的核酸數(shù)量和質(zhì)量可能存在差別,,從而直接影響檢測結(jié)果,。他建議,,對于某些高度疑似病例,或檢測結(jié)果難以確定的病例,,建議用2種以上試劑進行檢測、驗證,。
“假陰性意味著漏檢,,不僅會導致臨床中對疑似患者不能快速確診,而且會使漏檢者成為潛在的病毒傳染源,?!壁w慶順為此提出建議,,一是盡量使用無核糖核酸酶污染的樣本采集管,二是將標本放置在可保護病毒核酸免受高溫滅活損壞的樣品保存液中,,從而確保樣品RNA從保存,、運輸?shù)礁邷販缁畹鹊玫饺瘫Wo,盡最大可能保證用于臨床檢測的核酸質(zhì)量,,減少病毒核酸可檢出模板在核酸提取前的人為損壞,。